BCA蛋白法含量测试盒介绍:
分光光度法50管/48样。
正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。此外,可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。
BCA蛋白法含量测试盒测定原理:
碱性条件下,蛋白质中半胱-氨酸、胱氨-酸、色氨-酸、酪氨-酸以及肽键,能将Cu2+还原成Cu+;2分子的BCA与 Cu+结合,生成紫色络合物,在540-595nm有吸收峰,562nm处吸收峰。
自备仪器和用品:
台式离心机、恒温水浴锅、可见分光光度计、移液器、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。
试剂组成和配制试剂:
A:液体 50mL×1瓶,4℃保存。试剂B:液体1mL×1支,4℃保存。标准蛋白:液体2mL×1支,4℃保存。
工作液配制:临用前请根据拟用工作液体积(样本数×1mL),将试剂A和B按照50:1的比例混合,盖紧后充分混匀。
样品中可溶性蛋白质提取:
1.液体样品:澄清无色液体样品可以直接测定。
2.组织样品:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液(自备,根据需要选用酶提取缓冲液或者蒸馏水或者生理盐水)冰浴匀浆,8000g,4℃离心10min,取上清,即待测液。
BCA蛋白法含量
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BCA蛋白法含量